Non-Status Epilepticus female rats show seizure-like behaviors in the chronic phase of Pilocarpine experimental model / Ratas sem Status Epilepticus apresentam comportamento do tipo crise epiléptica na fase crônica do modelo experimental da Pilocarpina

Only few studies have focus on animals that received Pilocarpine (Pilo) and did not develop behavioral status epilepticus (SE) and, whether they may become epileptic in the model's chronic phase. Previews works observed mossy fiber sprouting in the hippocampus of Non-SE (NSE) rats, while others observed spontaneous and recurrent seizures (SRS) 6 - 8 months after animals received Pilo. It is known that neuronal excitability is influenced by female hormones, as well as, the occurrence of SE in castrated and non-castrated female rats. However, it is not known whether females that received Pilo and did not show SE, may have SRS. The aim of this work was to investigate whether castrated and non-castrated female rats that did not show behavioral SE after Pilo, will develop SRS in the following one-year. For that, animals received 360 mg/kg of Pilo and were video monitored for 12 months. SE females from castrated and non-castrated groups became epileptic since the first month after drug injection. Epileptic behaviors were identified watching video monitoring recordings in the fast speed. Castrated and Non castrated NSE animals showed behaviors resembling seizures described by Racine Scale stages 1 - 3. Motor alterations showed by NSE groups could be observed only when recordings were analyzed in slow speed. In addition, behavioral manifestations as, rhythmic head movements, sudden head movements, whole body movements and immobility were also observed in both, SE and NSE groups. We concluded that NSE female rats may have become epileptic. Adding to it, slow speed analysis of motor alterations was essential for the observation of NSE findings, which suggests that possibly many motor alterations have been underestimated in epilepsy experimental research.

Poucos são os estudos com foco em animais que receberam Pilocarpina (Pilo) e não desenvolveram status epilepticus (SE) comportamental e, se os mesmos se tornarão epilépticos na fase crônica do modelo. Autores observaram o brotamento das fibras musgosas no hipocampo de ratos Não-SE (NSE), enquanto outros observaram crises espontâneas e recorrentes (CER) 6 - 8 meses após receberam a droga. A excitabilidade neuronal é influenciada pelos hormônios femininos e, da mesma forma, a ocorrência de SE em ratas castradas e não-castradas. Entretanto, não é sabido se as fêmeas que não apresentam SE terão CER. O objetivo deste trabalho foi investigar se fêmeas castradas e não castradas que não tiveram SE comportamental após a injeção de Pilo desenvolverão CER dentro de um ano. Para isto, os animais receberam 360 mg/kg de Pilo e foram videomonitorados por 12 meses. As fêmeas SE castradas e não-castradas se tornaram epilépticas desde o primeiro mês pós Pilo. O comportamento epiléptico foi identificado assistindo as gravações na velocidade rápida. As fêmeas NSE castradas e não-castradas apresentaram comportamentos similares aos estágios 1 - 3 da Escala de Racine. As alterações motoras nestes grupos (NSE) foram observadas apenas quando as videomonitoração foi analisada na velocidade lenta. Além destas, manifestações comportamentais como movimentos rítmicos da cabeça, movimentos súbitos da cabeça, movimentos de todo o corpo e imobilidade também foram observadas em ambos grupos, SE e NSE. Concluímos que as fêmeas NE podem ter se tornado epilépticas. Adicionado a isto, a análise das alterações motoras na velocidade lenta foi essencial para a observação dos achados das fêmeas NSE, o que sugere que possivelmente muitas alterações motoras têm sido subestimados na pesquisa em epilepsia experimental.

Salivary stimulation by prolonged release of pilocarpine in sjõgren’ syndrome

Introduction: Prolonged drug delivery in the oral cavity offers many advantages, such as reducing adverse effects. Pilocarpine is an FDA-approved parasympathomimetic drug for the treatment of glandular hypofunction; however, its adverse effects limit its use. Objective: To evaluate the stimulation of salivary flow by the use of pilocarpine-releasing films, as well as their effects on the symptoms of xerostomia and adverse effects in patients with Sjõgren’s syndrome (SS). Materials and methods: Hydroxypropylmethylcellulose (Methocel K4MCR) films were prepared in 1 percent acetic acid and pilocarpine was added under magnetic stirring. The pH and thickness, as well as diffusion uniformity and kinetics of drug release per cm2 were evaluated by spectrophotometry. The films were tested sublingually in 40 patients with Sjõgren’s syndrome for a period of two weeks. Changes in their salivary flow were evaluated by analyzing samples of total saliva. Additionally, patients were screened for symptoms of xerostomia and adverse effects. Results: The films had a pH of 2.91 +/- 0.035, a thickness of 0.06866 +/- 0.00152μm, and a diffusion uniformity of 91 percent per cm2. Use of the films resulted in an increase in salivary flow in both primary and secondary Sjõgren’s syndrome, but this increase was only significant in primary SS. Conclusion: Films showed optimal physicochemical properties for their administration, and proved effective in stimulating salivary flow without causing adverse effects during their administration.

Efeito antioxidante da buspirona no modelo de epilepsia induzida por pilocarpina / Antioxidant effect of buspirone in epilepsy model induced by pilocarpine

CONTEXTO: Crises epilépticas induzidas por pilocarpina podem produzir alterações histopatológicas em muitas regiões cerebrais como consequência da produção excessiva de radicais livres.OBJETIVO: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito antioxidante da buspirona no modelo de epilepsia induzida por pilocarpina.MATERIAL E MÉTODOS: Quarenta e oito animais foram divididos em quatro grupos. O primeiro grupo foi tratado com solução salina 0,9% (Controle). O segundo grupo foi tratado com pilocarpina 400 mg/kg (P400). Por sua vez, o terceiro grupo foi tratado com buspirona 5 mg/kg (BUSP) durante 14 dias consecutivos. Já os animais do quarto grupo foram tratados com buspirona durante 14 dias consecutivos, e, 30 minutos após a última administração dela, os camundongos receberam P400 (BUSP + P400).RESULTADOS: Durante o período do tratamento não se observaram sinais de toxicidade e nenhuma morte entre os animais tratados com buspirona. Em nosso estudo o grupo tratado com P400 demonstrou um aumento significativo da produção de nitrito e nos níveis de peroxidação lipídica após as crises epilépticas. Por outro lado, no hipocampo dos animais que receberam o pré-tratamento com buspirona e após 30 minutos receberam P400, foi observada redução significativa nos níveis de peroxidação lipídica (65%) e nitrito (85%), bem como aumento na atividade da enzima superóxido dismutase.CONCLUSÃO: O pré-tratamento com BUSP aumentou a latência para primeira crise epiléptica e diminuiu a taxa de mortalidade e o número de animais que apresentaram crise epiléptica e que progridem para o estado de mal epiléptico. Além disso, apresentou efeitos anticonvulsivantes associados com a redução do estresse oxidativo hipocampal no modelo de epilepsia induzida por pilocarpina.

BACKGROUND: Pilocarpine-induced seizures can cause pathological changes in many brain regions as a result of excessive production of free radicals.OBJECTIVE: The objective of this study was to evaluate the antioxidant effect of buspirone in the epilepsy model induced by pilocarpine.MATERIAL AND METHODS: Forty-eight animals were divided into four groups. The first group was treated with saline 0.9% (control); the second group received pilocarpine 400 mg/kg (P400); the third group was treated with buspirone 5 mg/kg (BUSP) for 14 consecutive days and animals in the fourth group were treated with buspirone for 14 consecutive days, and 30 minutes after the last buspirone administration were administered with P400 (BUSP + P400).RESULTS: No toxicity signs or death were observed in buspirone-treated animals. P400 group showed a significant increase in nitrite production and lipid peroxidation after seizures. Moreover, reduction in both the lipid peroxidation level (65%) and nitrite content (85%) as well as an increase in superoxide dismutase activity was detected following P400 injection in the hippocampus of buspirone-pretreated mice.DISCUSSION: Pretreatment with BUSP increased latency to first seizure, decreased the mortality rate and number of animals that presented seizures and progression to status epilepticus, showing potent anticonvulsant effects associated with reduction of hippocampal oxidative stress.

Pilocarpina no tratamento de xerostomia em pacientes submetidos à iodoterapia: estudo piloto / Pilocarpine used to treat xerostomia in patients submitted to radioactive iodine therapy: a pilot study

Xerostomia é uma queixa tardia frequente associada à iodoterapia. Terapias para o tratamento desta morbidade podem proporcionar melhora na qualidade de vida dos pacientes com câncer de tireoide submetidos à iodoterapia adjuvante. OBJETIVOS: Relatar a experiência com o uso da pilocarpina no tratamento de xerostomia em pacientes com câncer de tireoide submetidos à iodoterapia adjuvante. MATERIAL E MÉTODOS: Cinco pacientes preencheram os critérios de inclusão e receberam 5mg de pilocarpina, 3 vezes ao dia, por uma semana. Os efeitos colaterais do medicamento e a resposta subjetiva à queixa de xerostomia após o tratamento foram avaliados. DESENHO DO ESTUDO: Trata-se de um estudo prospectivo, não-randomizado. RESULTADOS: Sudorese foi o efeito colateral mais comum com o uso da pilocarpina, seguido por cansaço e dor de cabeça. Dois pacientes relataram alívio da xerostomia com o uso da medicação, mas somente um paciente foi capaz de tolerar os efeitos colaterais. CONCLUSÕES: Pilocarpina parece aliviar os sintomas de xerostomia em pacientes submetidos à iodoterapia, já que o medicamento é capaz de estimular o fluxo salivar. No entanto, os efeitos colaterais observados inviabilizam seu uso por recusa por parte dos pacientes em continuar a terapia por períodos mais longos.

Xerostomia complaint is very commonly associated to radioactive iodine therapy. Alternatives to treat this morbidity can offer better quality of life to patients with thyroid cancer submitted to adjuvant iodine therapy. AIM: to report on the experience with pilocarpine on the treatment of xerostomia in thyroid cancer patients submitted to adjuvant radioactive iodine therapy (RIT). MATERIALS AND METHODS: The five patients who met the inclusion criteria received 5mg of pilocarpine, 3 tid for one week. Side effects of the drug and subjective response to xerostomia complaints after treatment were evaluated. DESIGN: it is a prospective, non-randomized study. RESULTS: Sudoresis was the most frequent side effect of pilocarpine use, followed by fatigue and headache. Two patients reported relief of xerostomia using pilocarpine, but only one patient was able to tolerate the side effects. CONCLUSIONS: Pilocarpine seems to relieve xerostomia complaints in thyroid cancer patients because it is able to stimulate salivary flow, but the observed side effects made the patients refuse long-term therapy continuation.

Vigabatrina aumenta atividade da superóxido dismutase no corpo estriado de ratos após crises convulsivas induzidas pela pilocarpina / Vigabratine increases superoxide dismutase activity in striatum of rat after pilocarpine-induced seizures

CONTEXTO: Tem sido sugerido que durante as crises convulsivas induzidas pela pilocarpina pode ser observado aumento no estresse oxidativo cerebral. Estudos sugerem que compostos com atividade antioxidante podem fornecer certo grau de proteção contra a neurotoxicidade induzida pelas crises convulsivas. OBJETIVOS: O presente estudo investigou as ações farmacológicas da vigabatrina nas alterações comportamentais e na atividade enzimática da superóxido dismutase (SOD) no corpo estriado de ratos adultos. MÉTODOS: Ratos Wistar adultos (2 meses de idade) foram usados nos experimentos e divididos em quatro grupos. O primeiro foi tratado com solução salina 0,9 por cento (grupo controle). O segundo grupo foi tratado com pilocarpina (400 mg/kg, i.p., grupo P400). O terceiro grupo foi tratado com vigabatrina (500 mg/kg, i.p., grupo VGB) e o quarto grupo foi tratado com vigabatrina (500 mg/kg, i.p.) e 30 minutos depois com pilocarpina (400 mg/kg, i.p., grupo VGB + P400). Os animais que apresentaram crises convulsivas, estado de mal epiléptico e não morreram durante o período de 24 horas de observação foram sacrificados para dissecação do corpo estriado para realização da determinação da atividade da SOD. RESULTADOS: Os estudos comportamentais revelaram que, após administração de pilocarpina, todos os animais apresentaram sinais colinérgicos periféricos, movimentos estereotipados e tremores. No mesmo grupo, foram observados, em 75 por cento dos animais, crises convulsivas e o estado de mal epiléptico. Por sua vez, o pré-tratamento com vigabatrina produziu redução significativa de 50 por cento nas crises convulsivas. Com relação aos estudos neuroquímicos, não foram observadas alterações na atividade da SOD no corpo estriado do grupo P400, em comparação aos valores do grupo controle. No entanto, no grupo VGB + P400 foi visto aumento significativo na atividade da SOD de 34 por cento e 35 por cento, quando comparado aos grupos controle e P400, respectivamente. ...

BACKGROUND: Pilocarpine-induced seizures have been suggested to be mediated by increases in oxidative stress. Current studies have suggested that antioxidant compounds may afford some level of neuroprotection against the neurotoxicity of seizures. OBJECTIVES: This study investigated the pharmacological actions of vigabatrin on behavioral changes and superoxide dismutase (SOD) activity in striatum of adult rats. METHODS: Adult rats (2 months old) were used in the experiments and divided into four groups. The first was treated with 0.9 percent saline (control group). The second group was treated with pilocarpine (400 mg/kg, i.p., P400 group). The third group received vigabatrin alone (500 mg/kg, i.p., VGB group) and the fourth group was treated with vigabatrin (500 mg/kg, i.p.) and 30 minutes later received pilocarpine (400 mg/kg, i.p., VGB + P400 group). The animals which had seizures and status epilepticus (SE) and did not die within 24 hours of observation were sacrificed to perform the neurochemical studies. RESULTS: Behavioral studies showed that the administration of pilocarpine produces peripheral cholinergic signs, tremors and stereotyped movements in all animals. An amount of 75 percent of those rats developed to seizures and SE. In turn, the pre-treatment with vigabatrin produced a 50 percent reduction in the rate of seizures and SE. Regarding the neurochemical studies, there were no changes in the striatal SOD activity in P400 group as compared to the control group. However, in the VGB + P400 group it was verified significant increases in SOD activity of 34 percent and 35 percent as compared to control and P400 group, respectively. DISCUSSION: Our results indicate that behavioral changes occur during seizures, but SOD activity remained unaltered during the acute phase of the convulsive crisis. Our findings suggest that the anticonvulsant effect of vigabatrin may be the result of modulation of this enzyme, in an attempt to protect ...

Ações neuroprotetoras da vitamina C no corpo estriado de ratos após convulsões induzidas pela pilocarpina / Neuroprotective actions of vitamin C in rat striatum after pilocarpine-induced seizures

CONTEXTO: As convulsões podem produzir danos neuronais em diversas áreas e, especialmente, nas estruturas límbicas. OBJETIVOS: O objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos neuroprotetores da vitamina C nas alterações histopatológicas observadas no corpo estriado de ratos convulsivos. MATERIAL E MÉTODOS: Foram utilizados ratos Wistar adultos. Os animais foram divididos em quatro grupos. O primeiro grupo foi tratado com salina 0,9 por cento (grupo controle) e o segundo, com pilocarpina (400 mg/kg, grupo P400). Já o terceiro e o quarto grupo foram tratados com vitamina C (250 mg/kg), e, 30 minutos depois, receberam P400 (grupo VIT C + P400) ou solução salina 0,9 por cento (grupo VIT C), respectivamente. Após os tratamentos, todos os grupos foram observados por 24 horas e, em seguida, sacrificados e seus cérebros removidos para as análises histopatológicas. RESULTADOS: O grupo P400 apresentou convulsões que progrediram para o estado epiléptico em 75 por cento dos animais. O pré-tratamento com vitamina C produziu uma redução de 35 por cento nesse índice. Os grupos P400 e VIT C + P400 apresentaram 80 por cento e 20 por cento de animais com lesão cerebral, respectivamente. No corpo estriado dos animais do grupo P400, houve um comprometimento de 50 por cento. Por sua vez, na região estriatal dos animais do grupo VIT C + P400 foi vista uma redução de 40 por cento nesse comprometimento. DISCUSSÃO: As convulsões induzidas pela pilocarpina são instaladas pelo sistema colinérgico e propagadas pela produção de radicais livres e pelo sistema glutamatérgico, resultado no desenvolvimento de dano cerebral. As drogas antioxidantes podem apresentar um potencial terapêutico para pacientes epilépticos na proteção contra as lesões cerebrais por meio da remoção desses radicais livres formados. Acredita-se, assim, que a vitamina C pode influenciar a epileptogênese e promover ações neuroprotetoras durante as convulsões.

BACKGROUND: Seizures may produce neuronal damage in several areas and especially in limbic structures. OBJECTIVES: This study aimed to evaluate the neuroprotective effects of vitamin C in the histopathological changes observed in rat striatum after seizures. MATERIAL AND METHODS: Healthy Wistar rats were divided into four groups. The first group was treated with 0.9 percent saline (control group) and the second one with pilocarpine (400 mg/kg, P400 group). Third and fourth groups were treated with vitamin C (250 mg/kg), 30 minutes before receiving P400 (P400 + VIT C group) or 0.9 percent saline (VIT C group), respectively. After the treatments, all groups were observed for 24 hours, sacrificed and dissected out to remove their brains for histopathological analysis. RESULTS: The group P400 presented seizures that progressed to status epilepticus in 75 percent of the animals. Pretreatment with vitamin C produced a 35 percent reduction in this index. P400 and P400 + VIT C groups revealed 80 percent and 20 percent of animals with brain injury, respectively. In P400 group, lesion severity of the striatum was 50 percent. In turn, in striatal region of animals treated with P400 + VIT C group, we detected a reduction of 40 percent in the severity degree. DISCUSSION: Pilocarpine-induced seizures are installed by the cholinergic system and propagated by free radicals and by glutamatergic system, leading to brain damage. The antioxidant drugs may have therapeutic potential for epileptic patients to protect against brain injure through removing free radicals produced, suggesting that vitamin C may influence epileptogenesis and promote neuroprotective actions during seizures.

Tear film and ocular surface alterations in chronic users of antiglaucoma medications

PURPOSE: Tear film can be altered by chronic medications that may disrupt the equilibrium responsible for the functioning of the lacrimal gland and ocular surface. The purpose of this study was to determine if antiglaucomatous chronic treatment induced alterations in the tear film and ocular surface. METHODS: After informed consent, 21 patients using antiglaucomatous eye drops for more than 8 months and 20 age- and sex-matched volunteers without eye and systemic medications (control group) were enrolled. The data of ocular discomfort, fluorescein and lisamine green staining, tear film break-up time and Schirmer test were collected and compared by Student's t test. The impression cytology data were graded and compared by chi-square test. RESULTS: Patients chronically using antiglaucomatous medications presented with significant higher fluorescein staining (p=0.003), lisamine green staining (p=0.02) and lower TFBUT (p=0.001). The other comparedparameters, including impression cytology were similar between the treated and control group (p>0.05). CONCLUSIONS: The present study shows that the tear film and the ocular surface are altered in patients under antiglaucomatous medications. In common, all medications were preserved with benzalkonium chloride. Efforts to minimize the adverse effects of chronic use of antiglaucomatous drugs must be addressed.

OBJETIVO: O filme lacrimal pode ser alterado por medicações crônicas, que podem comprometer o equilíbrio responsável pela função da glândula lacrimal e da superfície ocular. O objetivo desse estudo foi determinar se o tratamento crônico com drogas antiglaucomatosas induz alterações no filme lacrimal e superfície ocular. MÉTODOS: Após o consentimento informado, 21 pacientes usando drogas antiglaucomatosas por mais de 8 meses e 20 voluntários com similar distribuição etária e por sexo, não usuários de medicação ocular ou sistêmica (grupo controle) foram incluídos. Os dados do desconforto ocular, coloração com fluoresceína e lissamina verde, tempo de ruptura do filme lacrimal e teste de Schirmer foram colhidos e analisados pelo teste t de Student. A citologia de impressão foi avaliada e comparada pelo teste de qui-quadrado. RESULTADOS: Pacientes usando cronicamente medicação antiglaucomatosa apresentaram ignificativamente maior coloração por fluoresceína (p=0,003), lissamina verde (p=0,02) e menor TRFL (p=0,001). Os outros parâmetros comparados, incluindo a citologia de impressão foram similares entre o grupo tratado e controle (p>0,05). CONCLUSÕES: Esse estudo demonstra que o filme lacrimal e a superfície ocular estão alterados em usuários de medicação antiglaucomatosa. Essas medicações apresentam em comum o cloreto de benzalcônio como conservante. Esforços para minimizar efeitos adversos do uso crônico de drogas antiglaucomatosas devem ser considerados.

Resposta das glândulas sudoríparas écrinas à estimulaçäo colinérgica em asmáticos

Avaliamos a funçäo do sistema colinérgico, através da resposta das glândulas sudoríparas à estimulaçäo com pilocarpina, em 56 crianças com asma brônquica. Um grupo de pacientes com mucoviscidose (19) e outro de crianças que näo apresentavam doenças respiratórias (19) serviu de controle e foi pareado em relaçäo à idade e sexo. Näo houve diferenças significativas na quantidade de suor nos três grupos, e também näo houve diferença na concentraçäo de sódio no suor entre o grupo de asmáticos e o grupo de crianças sem doenças respiratórias. Estes resultados opöem-se aos resultados de estudos com indivíduos adultos e poderiam sugerir que a respostas aumentada do sistema colinérgico é exclusiva do aparelho respiratório ou que as anormalidades de ordem sistêmica do parassimpático em asmáticos säo adquiridas após a infância